酵母

酵母Pichia Pastoris.已广泛用于异源蛋白的表达,主要是真核来源。P. Pastoris.是一种单细胞真核生物,它结合了原核和真核生物的优点。培养和进行分子遗传操作的易于培养和进行分子遗传操作类似于原核生物的培养,例如大肠杆菌。酵母具有较高真核生物的许多优点,包括进行翻译后蛋白质修饰的能力,例如糖基化。酵母中的表达也是期望在细菌表达系统中未形成正确的二硫键的蛋白质。
P. Pastoris.是一种甲基脱毛酵母,能够将甲醇作为其唯一的碳源代谢。醇氧化酶(AOX1)启动子对照醇氧化酶的表达,其催化甲醇代谢的第一步。通常,甲醇诱导的细胞中的总可溶性蛋白质的30%是醇氧化酶。一些匹赖表达载体利用强大的AOX1启动子,并使用甲醇诱导感兴趣的基因的高水平表达。蛋白质表达,达到每升素培养物,可以进行P. Pastoris.对于细胞内和分泌的蛋白质。从基因到蛋白质的过程需要将靶基因克隆到匹赖表达质粒,转化,基因集成,表达筛选和蛋白质产生的选择。